Pet klasifikacijskih tehnologija krvnih zrnaca je sveobuhvatna primjena optike, mehanike, mehanike fluida, elektroničkih računara, ćelijske biologije, imunologije i drugih disciplina. Omogućuje protok izmjerenog rastvora kroz mjerno područje i otkrivanje fizičkih i kemijskih svojstava svake ćelije jednu po jednu. Metoda za brzo kvantitativno određivanje i analizu protočnih ćelija ili podćelija velike brzine. Može analizirati hiljade ćelija u jednoj sekundi i istodobno izmjeriti više parametara ćelija. Metoda impedancije koristi se i u hematološkom analizatoru pet klase, takozvanoj metodi impedancije protoka omotača.
Na konvencionalnom brojaču krvnih zrnaca, crvene krvne stanice (RBC) i trombociti (PLT) dijele mjerni kanal, a princip mjerenja sadržaja hemoglobina (HGB) jednak je za bilo koji tip i stepen instrumenta. Postoji poseban kanal za brojanje i klasifikaciju bijelih krvnih zrnaca. Sada ćemo ukratko predstaviti tehničke metode i principe koji se koriste u svakoj ispitnoj jedinici na analizatoru.
1. Određivanje sadržaja hemoglobina
Određivanje sadržaja hemoglobina je dodavanje hemolitičkog sredstva u razrijeđenu krv kako bi se hemoglobin oslobodio iz crvenih krvnih zrnaca. Potonji se kombiniraju s hemolitičkim sredstvom i formiraju derivat hemoglobina koji ulazi u sistem za ispitivanje hemoglobina i uspoređuje ga na određenoj talasnoj dužini (obično 530-550 nm). Promjena boje i apsorpcije proporcionalna je sadržaju Hb u tečnosti, a instrument može prikazati koncentraciju Hb.
Različite serije analizatora krvi imaju različite formule za podršku hemolitičkim agensima, a formirani derivati hemoglobina su takođe različiti, ali većina maksimalnih spektra apsorpcije je blizu 540nm. Posljednjih godina, mnogi vrhunski analizatori usvojili su metodu laserskog rasipanja svjetlosti za analizu hemoglobina pojedinačnih crvenih krvnih zrnaca kako bi umanjili utjecaj visokog WBC, hiloemije, visokog bilirubina itd. Na kolorimetriju HBG.
2. Otkrivanje crvenih krvnih zrnaca i trombocita
Otkrivanje crvenih krvnih zrnaca važan je dio analizatora krvi. U prošlosti je otkrivanje crvenih krvnih zrnaca uglavnom koristilo metodu impedanse za brojanje broja i volumena crvenih krvnih zrnaca za razvrstavanje signala različitih veličina i ispis histograma raspodjele volumena crvenih krvnih zrnaca. Međutim, kombinacija optike i električne impedancije sada se koristi za provođenje trodimenzionalne analize (3D) na volumenu crvenih krvnih zrnaca kako bi se dobili precizniji rezultati.
Na primjer, Bayer-ov ADVIA 120 koristi rasipanje svjetlosti za otkrivanje crvenih krvnih zrnaca, a koristi rasipanje svjetlosti pod malim uglom i rasipanje pod velikim uglom dva mjerna sistema za istodobno mjerenje 1 crvene krvne ćelije i mjeri volumen i ukupan broj jedno crveno krvno zrnce u skladu sa veličinom energije pretvorbe svjetlosti pod malim uglom; Rasipanje svjetlosti pod visokim uglom može dobiti koncentraciju pojedinačne hemoglobina, koja može precizno dobiti MCV (prosječni volumen crvenih krvnih zrnaca), MCH (prosječni sadržaj hemoglobina), MCHC (prosječna koncentracija hemoglobina) i crtati dijagrame rasipanja crvenih krvnih zrnaca, jedno crveno volumen krvnih zrnaca i crvenih krvnih zrnaca Histogram internog sadržaja Hb i izračunajte parametre kao što su RWD (širina distribucije volumena crvenih krvnih zrnaca), HDW (širina distribucije hemoglobina crvenih krvnih zrnaca).
Zbog očigledne razlike u zapremini trombocita i crvenih krvnih zrnaca, lako je razlikovati fotoelektrične signale koje mjere istovremeno njih dvoje sa ograničenim pragom. Stoga se do sada za analizu pune krvi koristio uobičajeni sistem analize za testove trombocita i crvenih krvnih zrnaca. Međutim, mjerni signali trombocita i crvenih krvnih zrnaca često se križaju. Na primjer, pulsni signal velikih trombocita može se zamijeniti s crvenim krvnim zrncima i prebrojati, a pulsni signal malih crvenih krvnih zrnaca može ući u kanal trombocita, što uzrokuje eksperimentalne pogreške. Razni proizvođači hematoloških analizatora koriste niz naprednih tehnologija kako bi smanjili smetnje u broju trombocita, poput tehnologije pomeranja protoka.
Tehnologija sweep protoka (sweep flow): Budući da se trombociti i crvene krvne stanice broje u istoj ćeliji za prebrojavanje, crvene krvne ćelije su velike veličine i formirat će veliki puls prilikom prolaska kroz centralnu indukcijsku zonu brojanja. Ako postoji povratni protok, on će također generirati ponovni ulazak zbog vrtložne struje. Mali impuls formiran na rubu osjetnog područja omogućava elektrodi da osjeti mali puls ekvivalentan veličini trombocita, koji će se lažno povećati broj trombocita. Tehnologija pomicanja protoka služi za istovremeno brojanje crvenih krvnih zrnaca i trombocita, iza rupe za brojanje crvenih krvnih zrnaca postoji stabilan protok tečnosti, tako da se crvene krvne stanice mogu odmah oprati kako bi se spriječio povratak u indukcijsko područje koje treba računa se kao trombociti.
