Šta je ELISA Microplate Reader?
Čitač mikroplata, to jest, enzimom povezan sa imunosorbent-om, je poseban instrument za imunosorbent koji je povezan sa enzimom. U stvari, to je poseban fotoelektrični colorimetar ili spektrofotometar u maski, a njegov osnovni radni princip je u osnovi isti kao i glavna struktura i fotoelektrični colorimetar. Može se jednostavno podijeliti u dvije kategorije, poluautomatski i potpuno automatski, ali njihovi radni principi su u osnovi isti. Njegovo jezgro je colorimetar, to jest, colorimetrijska metoda se koristi za analizu sadržaja antigena ili antitijela. ELISA određivanje općenito zahtijeva da konačni volumen testnog rješenja bude manji od 250μL, a test se ne može dovršiti općim fotoelektričnim colorimetrom, tako da postoje posebni zahtjevi za fotoelektrični colorimetar u čitač mikroplata.
Princip
Čitač mikroplata je zapravo fotoelektrični colorimetar posebne namjene ili spektrofotometar u maski, a njegov osnovni radni princip je u osnovi isti kao i glavna struktura i fotoelektrični colorimetar. Na figuri se vidi rad jednokalenog automatskog čitača mikroplata. Shematski dijagram. Svjetlosni talas koji emitira svjetiljka izvora svjetlosti pretvara se u monokromatsko svjetlo filterom ili monokromatorom, te ulazi u primjerak pod testom u plastičnom mikroporoznom stupu. Dio monokromatske svjetlosti apsorbira primjerak, a drugi dio se prenosi kroz primjerak osvijetljena na fotodetektor, fotodetektor pretvara različite svjetlosne signale primjerka koji se testiraju u odgovarajuće električne signale. Električni signali se obrađuju pre-amplifikacijom, logaritamsko pojačanje, i analogno-digitalnom konverzije. Unesite mikroprocesor za obradu i izračunavanje podataka, i na kraju prikažite rezultate po prikazu i štampaču. Mikroprocesor također kontrolira kretanje mehaničkog pogonskog mehanizma u X smjeru i Y smjeru za kretanje mikroplate kroz kontrolno kolo, kako bi se realiznuo proces automatskog otkrivanja umnožavanja. Ostali čitači mikroplata koriste ručno kretanje mikroplate za detekciju, tako da su mehanički pogonski mehanizam i kontrolni krug u X i Y smjerovima izostavjeni, tako da je instrument manji, a struktura jednostavnija.
Mikroplata je prozirna plastična ploča posebno korištena za testiranje uzorka. Ploča ima više redova malih rupa uniformne veličine, a odgovarajući antigen ili antitijelo je ugrađen u rupu. Svaka mala rupa može držati nekoliko deset mililitera otopine.
Svjetlost je elektromagnetski talas. Talasna dužina od 100nm-400nm naziva se ultraljubičasta svjetlost, svjetlost između 400nm i 780nm može se promatrati ljudskim okom, a talasna dužina veća od 780nm naziva se infracrvena svjetlost. Ljudi mogu vidjeti samo boje jer svjetlost udara u objekt i reflektira se natrag objektom. Zelene biljke su zelene jer većina biljaka apsorbira crveno-narančasto svjetlo i plavo-ljubicasto svjetlo, ali ne apsorbuju i reflektiraju zelenu, pa biljke izgledaju zeleno. Princip mjerenja čitača mikroplata je otkrivanje apsorpciju analita na određenoj talasnoj dužini.
Struktura
Tu su 40-dobro tanjuri, 55-dobro ploče, 96-dobro ploče, i tako dalje. Različiti instrumenti koriste različite ploče otvora, koje se mogu testirati jedna po jedna ili red po red.
Monokromatsko svjetlo koje koristi čitač mikroplata može se dobiti ili putem koherentnog filtera ili istog monokromatora kao spektrofotometar. Kada koristite filter kao filter uređaj, isti je kao običan colorimetar. Može biti stavljena ispred mikroplate ili iza mikroplate. Nakon kondenzatora, dijafragma dosiže do reflektora, odražava se reflektorom na 90° i prolazi kroz obojeni rastvor vertikalno, a zatim se šalje kroz filter. U fotocell.
Iz dijagrama radnog bloka i dijagrama putanje svjetlosti čitača mikroplata može se vidjeti da ima sljedeće razlike sa običnim fotoelektričnim colorimetrima:
(L) Spremnik za obojeno rješenje koje treba testirati više ne koristi kuvetu, već plastičnu mikroplatu. Mikroplata je obično napravljena od prozirnog polietilenog materijala, koji ima snažan adsorpcioni efekat na antigen i antitijela, pa se koristi Djeluje kao čvrsti fazni nosač.
(2)Jer je plastična mikroplata koja sadrži uzorak višeredna porozna, svjetlost može proći samo vertikalno, tako da svjetlosni snop čitača mikroplate prolazi kroz otopinu koju treba testirati, a mikroplata vertikalno. Svjetlosni snom može biti od vrha do dna ili može proći kroz colorimetrijsku tekućinu od dna do vrha.
(3) Čitači mikroplata obično ne samo da koriste A, već ponekad koriste i optičku density OD da izraze apsorpciju. Čitači mikroplata se mogu podijeliti na dva tipa: jednokalenski i višekalenski, a jednokaleni se dijeli na dva tipa: automatski i ručni. Automatski tip instrumenta Postoji mehanički pogon mehanizam u X i Y smjerovima, koji može poslati male rupe mikroplate L jednu po jednu ispod zrake za testiranje, a ručni tip koristi ručno kretanje mikroplate za mjerenje.
Na osnovu jednokalenog čitača mikroplata razvijen je višekalenski čitač mikroplata. Ova vrsta čitača mikroplata je općenito automatizirana. Nema više snopa i više fotodetektora, kao što je 12-kanalni instrument sa 12 snopa ili 12 izvora svjetlosti, 12 detektora i 12 pojačala, pod djelovanjem mehaničkog pogonskog uređaja u X smjeru, 12 uzoraka se otkriva u nizu. Brzina detekcije multi-kanalnog čitača mikroplata je brza, ali njegova struktura Složenije cijene su također više.
Raspon primjene čitača mikroplata
Hematološki test test antitijela vezan za trombocite PAIgA, PAIgG, PAIgM
Određivanje D-Dimer D-Dimera
Određivanje proizvoda za degradaciju fibrina u serumu FDP
Određivanje T3, T4 sa trijodotironinom i tetraiodotironinom
Imunološki test C-reaktivno određivanje proteina CRP
Određivanje imunoglobulina IgD, IgE
Određivanje cirkulirajućih imunoloških kompleksa CIC
Određivanje reumatoidnih faktora IgG, IgA, IgM RF
Antitiroglobulinski antitijelo, određivanje mikrosomskih antitijela TG, TM
Imunološka detekcija raka tumora Alfa-fetoprotein određivanje AFP
Određivanje karcinoembrionske antigenske CEA
Određivanje prostate specifičnog antigena PSA
Određivanje raka gušterače, rak bilijarne trakte, rak želuca CA19-9
Određivanje raka jajnika CA125
Određivanje raka dojke CA15-3
Određivanje karcinoma skvamosnih ćelija grlića maternice SCC
Detekcija višestrukog raka koštane srž
Određivanje raka štitnjače hTG
Imunološki test zarazne bolesti, serološki test hepatitisa A, anti-HAV-IgM
Test serologije hepatitisa B Dva i po para
Detekcija serologije hepatitisa C Anti-HAV-IgG, anti-HCV-IgM
Serološki otkrivanje hepatitisa D Anti-HDV-IgG, anti-HDV-IgM
Serološki otkrivanje hepatitisa E Anti-HEV-IgG
Otkrivanje antitijela na hemoragijsku groznicu sa sindromom bubrega HFRS-IgG
Detekcija japanskog antitijela protiv virusa encefalitisa IgM
Otkrivanje antitijela virusa humane imunodeficijencije (ie, regionalna AIDS) HIV β 2 M
Test funkcije prenatalne i postnatalne nege Toxoplasma virus toxoplasma test TOXO
Detekcija virusa rubele RV
CmV detekcije cistomegalovirusa
Detekcija herpes simplex virusa Anti-HSV (I., II.)
Drugi takođe mogu da rade genetsko testiranje i životinjske talože, pesticide i ostale predmete inspekcije itd.
